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貝爾搖床的細(xì)胞比例對(duì)增強(qiáng)其毒性分析

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2020-11-23 08:54【

對(duì)象與方法


注射用醋酸西曲瑞克(GnRH-ant,Merck,德國), 人絕經(jīng)期尿促性腺激素(human menopausal gonadotropin, HMG,麗珠醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司),人絨毛膜促性腺激 素(human chorionic gonadotropin,HCG,麗珠醫(yī)藥集團(tuán) 股份有限公司)。胞內(nèi)染色試劑盒(BioLegend,美國), Annexin Ⅴ染色試劑盒 [ 賽默飛世爾科技(中國)有限公 司 ]。5- 溴脫氧尿嘧啶核苷(5-bromodexyuirdine,BrdU, Sigma,美國),Ⅳ型膠原酶(Sigma,美國)。搖床(海門市其林貝爾儀器制造有限公司),低溫離心機(jī)(Eppendorf, 德國),流式細(xì)胞儀(BD,美國)。使用眼科剪將收集的小 鼠子宮組織剪碎至約 1 mm3 碎塊,經(jīng)Ⅳ型膠原酶消化后 加入含 5% 胎牛血清培養(yǎng)液終止消化。


結(jié)果


以 CD45、CD3 和 NK1.1 標(biāo)記小鼠 uNK 細(xì)胞后,采 用熒光標(biāo)記的磷脂結(jié)合蛋白 Annexin Ⅴ染色,并用流式細(xì) 胞術(shù)檢測(cè) GnRH-ant 對(duì) uNK 細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,GnRH-ant 組小鼠 uNK 細(xì)胞凋亡水 平下降(P=0.004)。Pf 和 Gz-B 是 NK 細(xì)胞發(fā)揮毒性作用的主要細(xì)胞因 子,本研究對(duì)小鼠 uNK 細(xì)胞內(nèi)的這 2 個(gè)因子的表達(dá)水平 進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,GnRH-ant 組小鼠 uNK 細(xì)胞內(nèi) Pf(P=0.000)和 Gz-B(P=0.034)的 表達(dá)水平均較高。近年來,GnRH-ant 方案憑借其簡便、靈活、安全、有 效等優(yōu)勢(shì)在輔助生殖領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用,但 GnRH-ant 對(duì)內(nèi)膜容受性的不利影響使得該方案的胚胎種植率及臨床 妊娠率偏低 。與自然周期方案 組相比,GnRH-ant 方案組子宮內(nèi)膜中多種與細(xì)胞黏附、信 號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及 T 細(xì)胞受體信號(hào)通路相關(guān)的基因表達(dá)發(fā)生了顯著變化






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