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中藥材木通鑒定-貝爾混合器應用

返回列表 來源:未知 發布日期:2020-07-15 08:55【

1 儀器與試藥


球 磨 儀 ( Retsch 公 司,德 國,型 號: MM400 型);渦旋混合器(海門市其林貝爾儀器制造 有限公司,型號:VORTEX-5 型);三溫三控水槽(上海博迅實業有限公司醫療設備廠,型號:DK-8D 型);離 心機(Sigma 公司,德國,型號:1-14 型);聚合酶鏈反 應(PCR)儀(Bio-Rad 公司,美國,型號:T100 型);超 微量分光光度計( Thermo Fisher Scientific 公司,美 國,型號:Nanodrop One 型);電泳儀(北京六一生物 科技有限公司,型號:DYY-6C 型);凝膠成像儀(BioRad 公司,美國,型號:Gel DocTMXR + 型);電子天 平(賽多利斯科學儀器有限公司,德國,型號:SQP 型)。


2 方法與結果


測序峰圖利用 CodonCode Aligner v. 8. 0. 2 軟件進行校對拼接,切除 5. 8S rRNA 和 28S rRNA 區 域 獲 得 ITS2 序 列,5. 8S motif 的 序 列 為 “CGAGGGCACGTCTGCCTGGGCGTCA”,28S motif 的 序 列 為“CGACCCCAGGTCAGGCGGGGCCACC”; 切 除 psbA 和 trnH 區域以獲得 psbA-trnH 序列,psbA motif 的 序 列 為 “ TCGAGCTCCAGCGACAAATGGATAA”,trnH motif 的 序 列 為“GGCGGATGTACCCAAGTGGCTCAGG”。在中藥材 DNA 條形碼鑒定 系統( http: / /www. tcmbarcode. cn) 對所獲得的序列 進行 BLAST 比對,利用 MEGA-X-10. 0. 5 軟件構建 NJ 系統發育樹。






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